Пользовательский поиск

Азотистый обмен и синтез белка в изолированных гепатоцитах

Функциональная полноценность печени, связанная с белковым обменом, предполагает участие гепатоцитов в синтезе собственных внутриклеточных белков и белков плазмы.

Продолжение ниже

Сирдалуд - применение и побочные эффекты

... лечение фибромиалгии Противопоказания и меры предосторожности Обратитесь к врачу, если к вам относится любое из следующих условий: нарушение функции печени дисфункция почек гипер- или гипотония проблемы с сердцем гиперчувствительность к любым компонентам препарата FDA (Управление по контролю ...

Читать дальше...

всё на эту тему


В интактной печени существует определенное равновесие между скоростями синтеза и распада белка. Свежеизолированные гепатоциты, как показывает анализ динамики содержания аминокислот в инкубационной среде, находятся в состоянии отрицательного азотистого баланса. Нарушение азотистого баланса может быть вызвано сдвигом равновесия между скоростями утилизации и образования аминокислот. Предрасполагающими факторами смеще­ния равновесия между анаболическим и катаболическим направ­лениями белкового обмена в изолированных гепатоцитах являются отсутствие естественных источников экзогенных аминокислот и из­менение функциональной полноценности клеток в процессе выде­ления.

Первые попытки Сеглена оценить в изолированных гепатоцитах интенсивность биосинтеза белка по включению меченых аминокис­лот привели к получению только ориентировочных данных из-за вы­сокой гетерогенности аминокислот по скорости включения в белок и утилизации в других метаболических процессах. Кроме того, NH4Cl, использованный автором в качестве ингибитора бел­ковой деградации, оказывал угнетающее действие и на белковый синтез. Это свойство маскировало истинную скорость включения метки в белок.

Для снижения интенсивности деградации белка в дальнейших исследованиях Сеглен использовал метиламин и лейпептин, которые не затрагивали биосинтетические процессы. Исключение влияния процессов катаболизма аминокислот достигалось использованием единственного предшественника — (14Сl)-валина, утилиза­ция которого в окислительном метаболизме печени происходила с очень низкой скоростью. Создав в инкубационной среде высокую его концентрацию (5-10мМ), удалось снизить разбавление метки продуктами протеолиза. При инкубации изолированных ге­патоцитов в таких условиях и без физиологической смеси амино­кислот метка начинала включаться в белок только через 10-20 минут и синтез шел линейно в течение 60 минут со скоростью 0,3-0,5% в час. Это в 10 раз ниже скорости деградации в аналогичных условиях и в 4-6 раз — в условиях сбалансированного белкового обмена in vivo.

Таким образом, свежеизолированные гепатоциты в течение пер­вых нескольких часов характеризуются отрицательным азотистым балансом за счет снижения анаболических процессов и преоблада­ния катаболических. Но это не приводит к необратимым изменениям в их метаболизме, и гепатоциты сохраняют способность увели­чивать скорость синтеза белка при добавлении в инкубационную среду экзогенных аминокислот в возрастающих концентрациях.

Увеличение концентрации аминокислот в инкубационной среде в 10 раз по сравнению с физиологическими значениями приводило к стимуляции биосинтеза в 1,5 раза. Отставание синтеза от интенсивности деградации в этих условиях не связано с доступностью экзогенных аминокислот внутриклеточным анаболическим процессам, так как и в случае интактных плазматических мембран, и при нарушении их целостности, 80% меченых аминокислот уже через 2 минуты инкубации проникает внутрь клеток. Гепатоциты должны иметь достаточное количество эндогенных ами­нокислот за счет 10-кратного преобладания катаболизма над ана­болизмом, тем более что они постоянно выделяют избыток амино­кислот в среду.

Возникает вопрос: почему добавление экзогенных аминокислот вызывает стимуляцию синтеза белка в условиях постоянного по­ступления эндогенного пластического материала и почему эта сти­муляция не достигает величин, свойственных in vivo, когда в клетках имеются потенциальные возможности для этого.

Пути реализации стимулирующего эффекта экзогенных амино­кислот могут обеспечиваться несколькими механизмами. Преинкубация гепатоцитов в смеси аминокислот предотвращает экскрецию эндогенных аминокислот, что может способствовать более полному использованию эндогенных аминокислот метаболическими системами клеток. Не исключена возможность использования экзогенных аминокислот в качестве дополнительного источника энер­гии. В пользу этого свидетельствуют данные о том, что стимулирую­щий эффект экзогенных аминокислот угнетается аминооксиацетатом — ингибитором аминотрансферазы — и обращается действием субстратов энергетического обмена, таких, как лактат и пируват. Если гепатоциты выделяются без субстратов, то начало вклю­чения меченых аминокислот в белок регистрируется только через некоторое время после интенсификации деградации белка. Скорость синтеза белка, регистрируемая по включению меченого валина, медленно нарастает во времени пропорционально увеличению концентрации аминокислот в результате деградации белка. Предварительная инкубация клеток в течение 30 минут со смесью аминокислот в соотношении, близком к физиологическому, способ­ствует быстрому включению метки в белок сразу после внесения валина в инкубационную среду. Из этого следует, что синтез белка в гепатоцитах не начинается, вероятно, до тех пор, пока концентрация внутриклеточного пула аминокислот не достигает необходимого уровня.

Использование инкубационных сред с аминокислотами в кон­центрациях, близких к физиологическим, а также превышающих их в 10 раз, способствовало возрастанию скорости синтеза белка в ге­патоцитах соответственно на 15-20% и в 1,5 раза по сравнению со скоростями синтеза при инкубации без аминокислот. Высокие концентрации аминокислот не безразличны для функции гепатоцитов. Большинство сбалансированных сред, используемых для инкубации гепатоцитов, содержат аминокислоты в концентрации, в 3 раза превышающей содержание в плазме крысы через 3 часа после приема пищи.

Описанные особенности стимуляции белкового синтеза в изоли­рованных клетках экзогенными аминокислотами свидетельствуют, что их количество, вероятно, является важным, но не определяю­щим фактором в регуляции скорости анаболизма, так как интенсивность процесса не достигает физиологических величин.




© Авторы и рецензенты: редакционный коллектив оздоровительного портала "На здоровье!". Все права защищены.


 
Текст сообщения*
Защита от автоматических сообщений
Загрузить изображение
 

nazdor.ru
На здоровье!
Беременность | Лечение | Энциклопедия | Статьи | Врачи и клиники | Сообщество


О проектеКарта сайта β На здоровье! © 2008—2015
nazdor.ru, nazdor.com
Контакты Наш устав

Рекомендации и мнения, опубликованные на сайте, являются справочными или популярными и предоставляются широкому кругу читателей для обсуждения. Указанная информация не заменяет квалифицированную медицинскую помощь, основанную на истории болезни и результатах диагностики. Обязательно проконсультируйтесь с врачом.

Размещенные на сайте информационные материалы, включая статьи, могут содержать информацию, предназначенную для пользователей старше 18 лет согласно Федеральному закону №436-ФЗ от 29.12.2010 года "О защите детей от информации, причиняющей вред их здоровью и развитию".