Пользовательский поиск

Функционально-метаболические свойства изолированных гепатоцитов

Изолированные гепатоциты сохраняют большинство функцио­нально-метаболических показателей, характерных для печени in situ. Необходимо, однако, остановиться на двух принципиальных момен­тах, касающихся использования гепатоцитарной модели in vitro.

Продолжение ниже

Методы регистрации метаболизма гидроперекисей в гепатоцитах

Для определения интенсивности процессов метаболизма гидроперекисей в арсенале исследователей имеется целый ... ... примене­ния, в том числе используется и для суспензии изолированных кле­ ток печени. Однако необходимо отметить, что регистрация комплекса 1 позволяет ...

Читать дальше...

всё на эту тему


Хотя в результате центрифугирования первичной суспензии про­исходит достаточно полное разделение паренхиматозных клеток от непаренхиматозных, следует учитывать возможность присутствия в конечной, достаточно гомогенной суспензии гепатоцитов небольших примесей, которые могут привносить особенности своего метаболиз­ма и влиять на показатели обмена основной популяции.

Изолированные гепатоциты сохраняют два основных функцио­нально-метаболических свойства интактной печени: глюконеогенез и образование желчных кислот. В связи с этим в них содержится существенно больше цитозольных ферментов углеводного обмена, нежели в непаренхиматозных клетках. Специ­фическими маркерными ферментами гепатоцитов являются глюко-6-фосфатаза (обнаружена только в гепатоцитах) и пируваткарбоксилаза (98% от содержания в других клетках). Непаренхима­тозные клетки практически не обладают способностью к глюконеогенезу. Специфичным только для гепатоцитов является чувствитель­ность к глюкагону, который инициирует глюконеогенез и гликолиз. Это свойство отсутствует у непаренхиматозных клеток. Под влиянием глюкагона в гепатоцитах происходит акти­вация двух ферментов: серин-пируватаминотрансферазы и тирозин-кетоглутараттрансаминазы, чего не наблюдается в непаренхиматозных клетках.

В гепатоцитах содержится 98,8% митохондрий всей печени. Благодаря этому они характеризуются существенно более высокой (на порядок) активностью ряда митохондриальных ферментов, например глутаматдегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы, но примерно одинаковой с непаренхиматозными клетками относительной цитохромоксидазной активностью.

Непаренхиматозные клетки в отличие от гепатоцитов обладают высокой активностью глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и существенно более высоким отношением глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа/сукцинатдегидрогеназа, что свидетельствует о преобладании в них активности глицеро-6-фосфатной челночной системы, транспортирующей восстановительные эквиваленты из цитозоля в митохондрии, в то время как в паренхиматозных клетках эту функцию выполняет малат-аспартатный шунт.

Пероксисомы обнаружены только в паренхиматозных клетках. В связи с этим каталазная активность связывается преимущественно с гепатоцитами (85% всей каталазной активности печени).

Хотя эндоплазматический ретикулум занимает в гепатоцитаз примерно такой же объем, как в непаренхиматозных клетках, он выполняет в них две специфические функции: в нем реализуется последнее звено синтеза глюкозы (с помощью фермента глюкозо-6-фосфатазы) и с ним связаны реакции биотрансформации веществ. В непаренхиматозных клетках оба эти процесса, по-видимому, играют несущественную роль: в них найдены лишь следовые количества цитохрома Р-450, реакции ацетилирования, видимо, вообще отсутствуют, бензпиренгидролазная активность также очень низка.

В то же время лизосомальный аппарат, хотя и имеется в гепатоцитах, однако он связывается преимущественно с функцией непаренхиматозных клеток. Лизосомальный объем последних в 9 раз больше, чем в паренхиматозных клетках, а активность лизосомальных ферментов в непаренхиматозных клетках, как правило, существенно выше, чем в паренхиматозных. Обладая более активным гидролитическими ферментами, непаренхиматозные клетки могут влиять на показатели интенсивности деградации изучаемых метаболитов, например, гидролитическое расщепление сульфатов, белков и липидов. В гепатоцитах более активны лишь лизосомальные ферменты, ответственные за катаболическое расщепление углеводных остатков гликопротеидов и гликолипидов.

Различия в активности ферментных систем двух клеточных популяций могут приводить к ошибочным выводам при анализе метаболических свойств плохо очищенной суспензии клеток печени.

Не менее важен вопрос о гетерогенности гепатоцитов различных зон печени. Гепатоциты из околопортальных (афферентных) и околовенозных (эфферентных) зон печеночных долей также от­личаются метаболическими свойствами и субклеточной структурой. Это связано с системой кровотока, обусловливающей различную аэрацию этих зон (наличие градиента кислорода в на­правлении от околопортальной к околовенозной части) и неодина­ковое снабжение гормонами, а также спецификой автономной ин­нервации. Благодаря этому в околопортальной зоне локализованы гепатоциты с более сильно выраженным аэробным окислительным метаболизмом. Для них характерно окисление жирных кислот, катаболизм аминокислот, глюконеогенез, синтез мочевины из аминокислот, секреция желчных кислот. В околовенозной области в гепатоцитах преобладает гликолиз, липонеогенез, уреогенез из ам­миака. В паренхиматозных клетках этой области происходит пре­имущественно биотрансформация эндогенных и чужеродных соеди­нений. Поэтому околопортальные гепатоциты богаты глюкозо-6-фосфатом, фруктозо-1,6-дифосфатом и высокоактивной фосфоенол-пируваткиназой, в то время как околовенозные гепатоциты содер­жат больше глюкокиназы и пируваткиназы, необходимых для обес­печения гликолиза. Имеются также данные, что гепатоциты околопортальной области могут выделять глюкозу, а гепатоциты около­венозной — утилизировать ее. Глюкагон активирует глюко­неогенез в околопортальной области и гликолиз в околовенозной. Инсулин влияет только на ферментативную активность гликолитических ферментов околовенозных клеток.

Зональная гетерогенность — явление динамичное. Она может модифицироваться в зависимости от функционального состояния клетки. Так, например, во время голодания увеличивается область с гепатоцитами, в которых преобладает глюконеогенез за счет соответствующего уменьшения количества клеток, обладающих гликолитической функцией. В период регенерации после частичной гепатэктомии, наоборот, в околопортальной зоне относительно усилива­ются гликолитические процессы. То же самое имеет место в около­венозной области при снижении аэрации печени.

Функция гепатоцитов и разделение на зональность существенно меняются при переходе от эмбрионального к постнатальному пе­риоду. Глюкоза крови матери является главным гликолитическим субстратом до рождения. Поэтому в гепатоцитах плода преоблада­ет гликолиз и нет разделения на метаболические зоны. После рож­дения основными энергетическими субстратами становятся жиры и белки материнского молока, и в гепатоцитах различных областей активируется глюконеогенез. Через 2 недели постнатального раз­вития по мере включения в пищу углеводов в паренхиме печени появляется разделение на функционально-метаболические зоны и в гепатоцитах преобладает либо гликолиз, либо глюконеогенез.

В настоящее время существуют методы зонального разделения гепатоцитов по их метаболическим свойствам. Различные фракции таких клеток используются дифференциально в зависимости от за­дач экспериментатора.




© Авторы и рецензенты: редакционный коллектив оздоровительного портала "На здоровье!". Все права защищены.


 
Текст сообщения*
Защита от автоматических сообщений
Загрузить изображение
 

nazdor.ru
На здоровье!

Пользовательский поиск

Узнайте больше:

Методы регистрации метаболизма гидроперекисей в гепатоцитах


Взаимосвязь дыхания и перекисьобразования в гепатоцитах


Синдромы отмены, наблюдающиеся после прекращения длительного приема психотропных средств


Сила и эффективность препаратов


Биотрансформация этанола в изолированных гепатоцитах


Печень. Основные понятия


Роль восстановленного глутатиона при индукции ПОЛ в гепатоцитах


Метаболические параметры оценки жизнеспособности изолированных гепатоцитов


Фармакология седации и аналгезии в ОРИТ - новые препараты


Бета-окисление в гепатоцитах


Всё на тему печень, метаболизм



Большинство диет для похудения просто крадут ваши деньги

Логин:

Пароль:



Забыли свой пароль?
Регистрация
войти / регистрация

Беременность | Лечение | Энциклопедия | Статьи | Врачи и клиники | Сообщество


О проектеКарта сайта β На здоровье! © 2008—2015
nazdor.ru, nazdor.com
Контакты Наш устав

Рекомендации и мнения, опубликованные на сайте, являются справочными или популярными и предоставляются широкому кругу читателей для обсуждения. Указанная информация не заменяет квалифицированную медицинскую помощь, основанную на истории болезни и результатах диагностики. Обязательно проконсультируйтесь с врачом.

Размещенные на сайте информационные материалы, включая статьи, могут содержать информацию, предназначенную для пользователей старше 18 лет согласно Федеральному закону №436-ФЗ от 29.12.2010 года "О защите детей от информации, причиняющей вред их здоровью и развитию".